L'amblyopie peut être mise en évidence par un examen ophtalmologique complet incluant l'étude de l'acuité visuelle. Celle-ci peut être déterminée très tôt chez le nourrisson, à partir de 3 mois, grâce à la méthode du regard préférentiel. Chez l'enfant plus vieux, différentes échelles sont utilisées: des dessins que l'enfant doit montrer ou nommer, etc. Les troubles de la réfraction ou de l'accommodation, et particulièrement l'hypermétropie, sont fréquents dans l'amblyopie.